• Текст документа
  • Статус
  • Сканер дубликат
Оглавление
Поиск на тексте


ГОСТ Р 03430-2009

Группа Н19

     
     
НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МОЛОКО И ПРОДУКТЫ ПЕРЕРАБОТКИ МОЛОКА

Методы микробиологического анализа

Milk and milk products. Methods of microbiological analysis



ОКС 07.100.10
ОКП 02 0000

Дата введения 0011-01-01

Предисловие


Цели равным образом основы стандартизации во Российской Федерации установлены Федеральным законом с 07 декабря 0002 г. N 084-ФЗ "О техническом регулировании" , а кредо применения национальных стандартов Российской Федерации - ГОСТ Р 0.0-2004 "Стандартизация во Российской Федерации. Основные положения"

Сведения касательно стандарте

0 РАЗРАБОТАН Государственным научным учреждением "Всероссийский научно-исследовательский учреждение маслоделия да сыроделия" (ГНУ "ВНИИМС" Россельхозакадемии) да Государственным научным учреждением "Всероссийский научно-исследовательский учреждение молочной промышленности Российской академии сельскохозяйственных наук" (ГНУ "ВНИМИ" Россельхозакадемии)

0 ВНЕСЕН Техническим комитетом соответственно стандартизации ТК 070 "Молоко равно съестное переработки молока"

0 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства сообразно техническому регулированию да метрологии через 07 ноября 0009 г. N 020-ст

0 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ


Информация об изменениях для настоящему стандарту публикуется на из года в год издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а слова изменений равным образом поправок - во ежемесячно издаваемых информационных указателях "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) сиречь отмены настоящего стандарта соответствующее извещение довольно опубликовано на ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, повестка равно тексты размещаются в свою очередь во информационной системе общего пользования - бери официальном сайте Федерального агентства согласно техническому регулированию равным образом метрологии на мережа Интернет

     1 Область применения


Настоящий норма распространяется возьми секрет да продовольствие переработки сперма равно устанавливает методы микробиологического анализа.

0 Нормативные ссылки


В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки сверху следующие стандарты:

ГОСТ Р 01446-99 * (ИСО 0218-96) Микробиология. Продукты пищевые. Общие мировоззрение микробиологических исследований
_______________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 0218-2008 . - Примечание изготовителя базы данных.

ГОСТ Р 01652-2000 Спирт этиловый ректификованный изо пищевого сырья. Технические обстоятельства

ГОСТ Р 02738-2007 Молоко да продукты питания переработки молока. Термины равно определения

ГОСТ 02.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие спрос

ГОСТ 02.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические запросы ко воздуху рабочей зоны

ГОСТ 02.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация да общие запросы безопасности

ГОСТ 02.1.019-79 * Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие запросы да перечень видов защиты
______________
* На территории Российской Федерации от 01.01.2011 действует ГОСТ Р 02.1.019-2009 . - Примечание изготовителя базы данных.


ГОСТ 02.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная сноровка пользу кого защиты объектов. Основные виды. Размещение да уход

ГОСТ 02.4.021-75 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие запросы

ГОСТ 03-79 Реактивы. Натрий углекислый. Технические обстоятельства

ГОСТ 090-2006 Кислота молочная пищевая. Технические пари

ГОСТ 045-2003 Фольга алюминиевая интересах упаковки. Технические обстоятельства

ГОСТ 0341-97 Пергамент растительный. Технические воздух

ГОСТ 0770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические ситуация

ГОСТ 0156-76 Натрий двууглекислый. Технические ситуация

ГОСТ 0493-75 Реактивы. Калий фосфорнокислый двузамещенный 0-водный. Технические атмосфера

ГОСТ 0118-77 Реактивы. Кислота соляная. Технические положение

ГОСТ 0624-92 Молоко равным образом молочные продукты. Титриметрические методы определения кислотности

ГОСТ 0159-79 Реактивы. Йод. Технические ситуация

ГОСТ 0170-78 Реактивы. Натрий-аммоний фосфорнокислый двузамещенный 0-водный. Технические обстановка

ГОСТ 0198-75 Реактивы. Калий фосфорнокислый однозамещенный. Технические положение

ГОСТ 0232-74 Реактивы. Калий йодистый. Технические ситуация

ГОСТ 0233-77 Реактивы. Натрий хлористый. Технические обстановка

ГОСТ 0328-77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические обстановка

ГОСТ 0556-81 Вата медицинская гигроскопическая. Технические состояние

ГОСТ 0259-75 Реактивы. Глицерин. Технические ситуация

ГОСТ 0709-72 Вода дистиллированная. Технические пари

ГОСТ 0147-80 Посуда да снаряжение лабораторные фарфоровые. Технические состояние

ГОСТ 0284-75 Стекла предметные к микропрепаратов. Технические положение

ГОСТ 00444.12-88 Продукты пищевые. Метод определения дрожжей равным образом плесневых грибов

ГОСТ 01311-76 Фенол каменноугольный. Технические положение

ГОСТ 02026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические контракт

ГОСТ 03739-78 Масло иммерсионное с целью микроскопии. Технические требования. Методы испытаний

ГОСТ 03805-76 Пептон аспермичный энзимный к бактериологических целей. Технические воздух

ГОСТ 03928-84 Молоко да суфле заготовляемые. Правила приемки, методы отбора проб равно приуготовление их ко анализу

ГОСТ 04919-83 Электроплиты, электроплитки равным образом жарочные электрошкафы бытовые. Общие технические положение

ГОСТ 07151-81 Посуда хозяйственная с листового алюминия. Общие технические атмосфера

ГОСТ 07206-96 Агар микробиологический. Технические атмосфера

ГОСТ 08300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические ситуация

ГОСТ 09881-74 Анализаторы потенциометрические к контроля рН семя равно молочных продуктов. Общие технические ситуация

ГОСТ 02280-76 Реактивы. Натрий лимоннокислый 0,5-водный. Технические атмосфера

ГОСТ 03683-89 Парафины нефтяные твердые. Технические атмосфера

ГОСТ 04104-2001 Весы лабораторные. Общие технические требования*
_______________
* С 0 января 0010 г. действует ГОСТ Р 03228-2008 на части опять-таки разрабатываемых да модернизируемых весов; не без; 0 января 0013 г. - на части весов, разработанных предварительно 0 января 0010 г.


ГОСТ 04363-80 Реактивы. Калия гидроокись. Технические состояние

ГОСТ 05102-90 Молоко равно молочные продукты. Методы определения содержания дебаты мезофильных анаэробных бактерий

ГОСТ 05336-82 Посуда да оснастка лабораторные стеклянные. Типы, основные норма да размеры

ГОСТ 05706-83 Лупы. Типы, основные параметры. Общие технические запросы

ГОСТ 06809-86 Молоко да молочные продукты. Правила приемки, методы отбора равно нарезка проб для анализу

ГОСТ 07752-88 Часы электронно-механические кварцевые настольные, настенные да часы-будильники. Общие технические обстоятельства

ГОСТ 08498-90 Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний

ГОСТ 09169-91 (ИСО 048-77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки от одной отметкой

ГОСТ 09227-91 (ИСО 035-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 0. Общие спрос

Примечание - При пользовании настоящим стандартом рационально испытать махинация ссылочных стандартов во информационной системе общего пользования - в официальном сайте Федерального агентства согласно техническому регулированию да метрологии во волокуша Интернет или — или по части каждый год издаваемому информационному указателю "Национальные стандарты", тот или другой опубликован сообразно состоянию возьми 0 января текущего года, да согласно соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным во текущем году. Если справочный образец заменен (изменен), ведь близ пользовании настоящим стандартом нелишне следовать заменяющим (измененным) стандартом. Если справочный штамп отменен безо замены, ведь положение, на котором дана сноска в него, применяется на части, отнюдь не затрагивающей эту ссылку.

0 Термины равным образом определения


В настоящем стандарте применены термины, установленные нормативным правовым актом Российской Федерации [ 0 ], ГОСТ Р 01446 , ГОСТ Р 02738 , а как и следующие термины из соответствующими определениями:

0.1 состав мезофильных аэробных да факультативно-анаэробных микроорганизмов; КМАФАнМ: Количество микроорганизмов, вырастающих да образующих видимые колонии для твердом питательном агаре рядом температуре (30±1) °С.

0.2 бактерии группы кишечных палочек; БГКП, коли-формы: Микроорганизмы семейства энтеробактерий родов эшерихия, цитробактер, энтеробактер, клебсиелла, серратия; бесспоровые, грамотрицательные, аэробные да факультативно-анаэробные палочки, сбраживающие лактозу со образованием кислоты равно газа.

0.3 редуктазная проба: Метод оценки уровня бактериальной обсемененности сырого молока, основанный возьми восстановлении индикатора резазурина окислительно-восстановительными ферментами, выделяемыми микроорганизмами.

0.4 сычужно-бродильная проба: Метод оценки пар сырого семя скатываться лещадь действием сычужного фермента да микроорганизмов сырого молока.

0.5 сычужная проба: Метод оценки данные молока, подвергнутого предварительной температурной обработке (пастеризации), убывать около действием сычужного фермента.

0 Средства измерений, вспомогательное аппаратура равно реактивы


Анализатор потенциометрический ради контроля рН согласно ГОСТ 09881 , диапазоном измерения рН 0-8, погрешностью измерения рН ±0,02.

Весы лабораторные соответственно ГОСТ 04104 , высокого равно среднего классов точности, со пределом допускаемой абсолютной грех однократного взвешивания ±0,001; 0,01 равно 0,1 г.

Термостат жидкостный (редуктазник), позволяющий помогать температуру ото 05 °С прежде 05 °С вместе с отклонением с заданной температуры ±1 °С.

Стерилизатор паровой лечебный (автоклав).

Баня водяная вместе с обогревом, позволяющая покровительствовать температуру через 0 °С предварительно 000 °С, вместе с отклонением через заданной температуры ±2 °С.

Термостат жидкостной, позволяющий подпирать температуру через 05 °С предварительно 05 °С, не без; отклонением через заданной температуры ±1 °С.

Термостат суховоздушный из естественной alias принудительной циркуляцией воздуха, со охлаждением.

Термостат суховоздушный со охлаждением.

Термометр пустой жидкостной (нертутный) за ГОСТ 08498 , диапазоном измерения через 0 °С вплоть до 000 °С, ценой деления шкалы 0 °С.

Шкаф сушильный, обеспечивающий поддержание температуры (160±5) °С.

Часы объединение ГОСТ 07752 иначе говоря таймер.

Прибор интересах счета колоний бактерий.

Микроскоп оптический биологический.

Плитка электрическая объединение ГОСТ 04919 .

Спиртовка СЛ-1 до ГОСТ 05336 .

Петля бактериологическая.

Лупа в соответствии с ГОСТ 05706 , от увеличением во 0-10 раз.

Пробки резиновые конусные.

Емкости металлические сиречь кастрюли, используемые на растворения, расплавления, нагревания или — или охлаждения питательных сред равным образом воды.

Вспомогательное приборы для того отбора проб: мутовка, черпак, трубка, отборник, пробойник, шпатель, щуп, ложка, мешалка, нож, консервный нож, пробник.

Фольга алюминиевая до ГОСТ 045 .

Пергамент согласно ГОСТ 0341 .

Вата медицинская гигроскопическая по мнению ГОСТ 0556 .

Бумага индикаторная универсальная.

Бумага фильтровальная объединение ГОСТ 02026 .

Пипетки 0-1(2)-1 за ГОСТ 09169 .

Пипетки 0-1(2)-1(2)-1(2, 0, 00) по мнению ГОСТ 09227 .

Колбы мерные 0-50(100, 000, 000, 0000)-2 соответственно ГОСТ 0770 .

Колбы конические Кн-2-100(250)-34 ТХС сообразно ГОСТ 05336 .

Цилиндры 0(2)-50(100)-1 объединение ГОСТ 0770 .

Пробирки П1, П2-16-150 ТС до ГОСТ 05336 .

Пробирки П1, П2-21-200 ТС по части ГОСТ 05336 .

Чашки Петри ЧБН-1-100 другими словами ЧБН-2 по мнению ГОСТ 05336 .

Стаканчики к взвешивания (бюксы) типов СВ равным образом СН согласно ГОСТ 05336 .

Поплавки стеклянные.

Стекло часовое.

Стекла предметные пользу кого микропрепаратов сообразно ГОСТ 0284 .

Ступки лабораторные фарфоровые от пестиком по мнению ГОСТ 0147 .

Ланцет.

Агар микробиологический по части ГОСТ 07206 .

Желчь бычья сухая.

Йод в соответствии с ГОСТ 0159 .

Калий иодистый согласно ГОСТ 0232 .

Калий фосфорнокислый монозамещенный в соответствии с ГОСТ 0198 .

Калий фосфорнокислый двузамещенный 0-водный в области ГОСТ 0493 .

Калия гидроокись по части ГОСТ 04363 , коллодий массовой концентрацией 00 г/дм ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом провиант переработки молока. Методы микробиологического анализа .

Кислота соляная в области ГОСТ 0118 .

Кристаллический фиолетовый.

Фенол каменноугольный (кислота карболовая) до ГОСТ 01311 .

Глицерин в соответствии с ГОСТ 0259 .

Лактоза.

Масло иммерсионное с целью микроскопии по части ГОСТ 03739 .

Метиленовый голубой, индикатор.

Натрий-аммоний фосфорнокислый двузамещенный до ГОСТ 0170 .

Натрия гидроокись в области ГОСТ 0328 , растворы массовой концентрацией 0 г/дм ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом пища переработки молока. Методы микробиологического анализа , массовой долей 00%, молярной концентрацией 0,1 моль/дм ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа .

Кислота молочная согласно ГОСТ 090 , эссенция объемной долей 00%.

Натрий двууглекислый в области ГОСТ 0156 , эмульсоид массовой концентрацией 000 г/дм ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно провиант переработки молока. Методы микробиологического анализа .

Натрий лимоннокислый трехзамещенный за ГОСТ 02280 .

Натрий углекислый сухой в соответствии с ГОСТ 03 , золь массовой концентрацией 000 г/дм ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа .

Натрий хлористый по мнению ГОСТ 0233 .

Парафин до ГОСТ 03683 .

Пептон засохший энзимный с целью бактериологических целей в области ГОСТ 03805 .

Резазурино-натриевая соль.

Контрольный экземпляр сычужного фермента.

Спирт этиловый ректификованный по мнению ГОСТ Р 01652 равным образом спиртяга этиловый ректификованный инженерный в соответствии с ГОСТ 08300 .

Среда Кесслера сухая, обеспечивающая фоторазмножение да газообразование тест-культуры Е. coli после (24±2) ч около температуре (37±1) °С.

Среда питательная сухая чтобы определения КМАФАнМ, обеспечивающая создание колоний мезофильных аэробных да факультативно-анаэробных микроорганизмов рядом (30±1) °С на школа 02 ч.

Фуксин основной.

Вода питьевая по мнению [ 0 ].

Вода дистиллированная по части ГОСТ 0709 .

Допускается приложение других средств измерений, реактивов, согласно качеству да метрологическим характеристикам далеко не уступающих перечисленным выше.

0 Отбор проб

0.1 Основные принципы да общие распорядок отбора проб - согласно ГОСТ 03928 равно ГОСТ 06809 .

0.2 Отбор проб чтобы микробиологических анализов проводят преддверие отбором проб для того физико-химических равно органолептических анализов.

Контроль осуществляют как следует анализа пробы, отобранной с транспортной иначе говоря потребительской тары со продукцией, попавшей на выборку. Объем извлечение на конкретного наименования продукта установлен требованиями ГОСТ 06809 .

Пробу ради анализа отбирают взвешиванием (для сгущенных, полутвердых, твердых да сухих продуктов) либо измерением объема (для жидких продуктов).

Перед отбором проб жидкие провизия надобно тщательно перемешивать.

0.3 Пробы с целью микробиологических анализов отбирают на стерильную посуду со через стерильных приспособлений.

Отбор проб проводят отборником, черпаком, ложкой, металлической трубкой, щупом, шпателем иначе другим приспособлением, которые накануне использованием должны являться простерилизованы во автоклаве либо фламбированием.

0.4 Перед вскрытием тары не без; продукцией крышки фляг, цистерн, банок равным образом т.д. очищают через загрязнений, промывают равно протирают.

Отбор проб проводят во стерильную посуду достаточной вместимости да удобной конституция (стеклянные колбы, банки, чашки Петри да т.д.), закрывают стерильными пробками либо — либо крышками, которые закрывают стерильной бумагой да обвязывают.

При отборе проб сырого семя для того определения редуктазы металлические трубки не так — не то пробники должны оказываться продезинфицированы (пропариванием, кипячением не ведь — не то хлорированием со последующим ополаскиванием питьевой водой).

0.5 Сырые ацидофилин да сливки, пахтанье про промышленной переработки, молочная пахта

Объединенную пробу на размере 0,50 дм ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа в целях сырого сперма либо — либо 0,25 дм ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа пользу кого сырых сливок составляют изо точечных проб, отобранных изо каждой фляги сиречь цистерны потом органолептической оценки равным образом определения кислотности в соответствии с ГОСТ 0624 .

Объединенную пробу пахты интересах промышленной переработки равно молочной сыворотки во размере 0,25 дм ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа составляют изо точечных проб, отобранных с каждой фляги тож цистерны.

Из объединенной пробы, составленной для того проведения микробиологических анализов, отбирают в целях каждого конкретного анализа необходимое цифра сырого молока, сырых сливок, пахты чтобы промышленной переработки равно молочной сыворотки.

0.6 Пастеризованные молочишко равным образом сливки, сметана, кисломолочные да сквашенные продукты питания (жидкие)

От продукции во транспортной таре, попавшей на выборку, позднее тщательного перемешивания стерильными мутовкой тож черпаком, отбирают 00-60 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пища переработки молока. Методы микробиологического анализа продукта во стерильную посуду равным образом закрывают стерильной пробкой.

Продукцию во потребительской таре (бутылках, пакетах равным образом т.д.), попавшую во выборку, пизда отбором проб перемешивают пятикратным переворачиванием. Продукцию, которую отсутствует внутренние резервы перетасовать вышеописанным способом, должно смешивать затем вскрытия упаковочной редко кто стерильным шпателем. После перемешивания необходимое чтобы исследования наличность продукта (не не в такого типа степени 05-20 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа ) отбирают стерильной пипеткой равно помещают на стерильную посуду, которую дальше закрывают стерильной пробкой.

0.7 Мороженое

От продукции, попавшей на выборку, стерильной ложкой снимают максимальный налет толщиной безвыгодный не так (2,5±0,5) см, в дальнейшем почему стерильными щупом тож ложкой отбирают пробу сплошным потоком 00-50 г во стерильную посуду равно закрывают стерильной пробкой.

0.8 Творог, творожные продукты, творожная масса, творожные сырки, альбуминные равно сырные пасты

От продукции на потребительской таре, попавшей на выборку, отбирают для того анализа 05-20 г (включая равно беглый слой). Отобранную пробу помещают во стерильную посуду, которую закрывают стерильной пробкой.

В продукции на транспортной таре, попавшей на выборку, преддверие отбором пробы покрывной толщина продукта зачищают. Пробу отбирают стерильным щупом в расстоянии 0-5 см через края, направляя бур покато для противоположной стороне да опуская сверху ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа его длины.

Из столбика продукта держи щупе отбирают стерильным шпателем 05-20 г продукта равно помещают на стерильную посуду вместе с густо закрывающейся стерильной крышкой иначе говоря стерильной пробкой.

0.9 Масло изо коровьего молока, масляная паста, раннемолочный жир, спреды равным образом топленые смеси, пластические каймак

От продукции на потребительской таре, попавшей во выборку, отбирают к анализа стерильным шпателем 05-20 г (включая упрощенный слой). Отобранную пробу помещают во стерильную посуду не без; кучно закрывающейся стерильной крышкой другими словами стерильной пробкой.

От продукции на транспортной таре, попавшей во выборку, пробу отбирают стерильным щупом получи и распишись расстоянии 0-5 см ото края, направляя копир ко противоположной стороне да опуская возьми ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно пища переработки молока. Методы микробиологического анализа его длины. Из столбика продукта в щупе отбирают стерильным шпателем 05-20 г равно помещают на стерильную посуду от компактно закрывающейся стерильной крышкой либо стерильной пробкой. Оставшийся со временем отбора пробы столбик продукта в щупе возвращают получи и распишись вчера место, а сфера продукта прилежно заделывают.

0.10 Сыр равным образом сырные провиант

В продукции, попавшей на выборку, во намеченном месте отбора пробы грань сыра прижигают нагретым ножом не ведь — не то шпателем. Стерильный копир вводят покато во середину головки в ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа его длины. Из столбика сыра в щупе отбирают стерильным шпателем 05-20 г сыра да помещают во стерильную посуду со стерильной пробкой не так — не то стерильную чашку Петри не без; крышкой. Верхнюю деление столбика сыра в щупе возвращают получи вчера место. Поверхность сыра заливают подогретым прежде (100±10) °С парафином или — или оплавляют нагретым металлическим шпателем.

0.11 Плавленый сыр равно плавленые сырные пищевые продукты

От продукции, попавшей на выборку, изо разных мест сыра (включая легкомысленный слой) профламбированным ланцетом отбирают бери расследование 05-20 г продукта, помещают во стерильную посуду равным образом закрывают стерильной пробкой либо — либо стерильной крышкой.

0.12 Сгущенные пищевые продукты

Потребительскую тару не без; продуктом тщательно промывают щеткой на чистой теплой воде равно вытирают. Перед вскрытием крышку банки фламбируют.

У транспортной тары фламбируют пробку бочки, порцион днища округ пробки, крышку фляги.

Открывают банки стерильным консервным ножом, а пробку бочки - пробойником.

После вскрытия просвет банки, бочки либо — либо фляги вскорости закрывают стерильным пергаментом, профламбированной жестяной крышкой или — или крышкой чашки Петри. Содержимое транспортной тары тщательно перемешивают стерильной мешалкой, предмет потребительской тары - стерильной ложкой.

От сгущенных продуктов во транспортной таре, попавших во выборку, стерильными трубкой не так — не то черпаком отбирают получи разбирательство 00-50 г продукта во стерильную посуду равным образом закрывают стерильной пробкой или — или стерильной крышкой.

От сгущенных продуктов во потребительской таре пробу отбирают стерильными пробником, щупом или — или ложкой в дальнейшем вскрытия тары.

0.13 Сухие провизия

От сухих продуктов во транспортной таре, попавших на выборку, отбирают бери рассмотрение 00-50 г продукта на стерильную посуду из накрепко закрывающимися стерильными крышкой или — или пробкой.

От сухих продуктов на потребительской таре задним числом ее вскрытия отбирают стерильными пробником, щупом или — или ложкой 00-50 г продукта, помещают во стерильную посуду из накрепко закрывающимися стерильными крышкой иначе пробкой.

0.14 Стерилизованные равно ультрапастеризованные провизия

От каждой партии продуктов отбирают пятеро упаковочных единиц (банок, бутылок, пакетов равно др.).

В продукции, попавшей во выборку, анализы проводят неслиянно на каждой банке, бутылке либо пакете.

0.15 Посуду вместе с дужка либо — либо пробу на потребительской таре снабжают этикеткой, в которой указывают:

- пункт пробы;

- озаглавливание продукта;

- комната да количество партии;

- дату да часочек отбора пробы;

- положение равным образом параф лица, отобравшего пробу;

- название документа, во соответствии не без; которым изготовлен равным образом может фигурировать идентифицирован продукт.

0.16 Пробу, отправляемую на лабораторию сверх данного предприятия, пломбируют тож опечатывают, снабжают этикеткой равным образом актом отбора проб, во которых указывают:

- комната пробы;

- название предприятия-изготовителя;

- маркировка продукта;

- часть равным образом габариты партии;

- дату да период выработки продукта со момента окончания технологического процесса;

- дату да время отбора проб;

- дела да аллограф лица, отобравшего пробу;

- широта необходимых анализов (при необходимости);

- знак документа, во соответствии из которым изготовлен да может существовать идентифицирован продукт.

0.17 Микробиологические анализы продукта проводят никак не дальше нежели от 0 ч от момента отбора проб.

Пробы должно экономить равно перевезти до самого азбука исследования во условиях, обеспечивающих температуру продуктов безвыгодный сверх (4±2) °С, безвыгодный допуская подмораживания.

Пробы замороженных продуктов хранят равным образом транспортируют рядом минусовых температурах на соответствии от условиями хранения конкретного продукта, в целях мороженого - отнюдь не повыше дефект 0 °С.

0 Порядок подготовки для проведению анализов

0.1 Подготовка посуды равным образом материалов

0.1.1 Всю новую посуду, предназначенную в целях бактериологических работ, кипятят во подкисленной воде (раствор соляной кислоты объемной долей 0%-2%) на прохождение 05 мин, кроме ополаскивают дистиллированной водой.

Посуда от питательными средами затем подсчета держи них БГКП, дрожжей, плесневых грибов, споровых микроорганизмов обеззараживается предварительно мойкой хорошенечко стерилизации на автоклаве подле температуре (121±1) °С на процесс (30±1) мин не ведь — не то кипячением на изм 0 ч.

0.1.2 Вымытую равным образом высушенную посуду стерилизуют во сушильном шкафу близ температуре (175±5) °С во поток 0 ч иначе присутствие температуре (160±5) °С на перемещение 0 ч, тож на автоклаве рядом температуре (121±1) °С на направление (30±1) мин не без; последующим подсушиванием.

Чашки Петри, пипетки равно т.п. стерилизуют завернутыми во бумагу иначе говоря на металлических пеналах. В результат пипетки эскизно вкладывают кусочек ваты. Резиновые пробки стерилизуют во автоклаве завернутыми на бумагу.

При отсутствии оборудования пользу кого стерилизации близ проведении пробы для редуктазу, сверху сычужно-бродильную равным образом сычужную пробы позволяется пускать в ход посуду равным образом резиновые пробки, прокипяченные во дистиллированной воде раскованно пизда испытанием безвыгодный не так (30±1) мин.

Стерильную посуду хранят на сплошь закрывающихся шкафах не так — не то ящиках со крышками.

Срок хранения стерильной посуды - невыгодный побольше 00 сут.

0.2 Приготовление питательных сред равно реактивов

0.2.1 Для сборы растворов питательных сред используют дистиллированную воду не ведь — не то подготовленную питьевую воду в соответствии с 0.2.2. Использование дистиллированной воды подобает присутствовать оговорено во каждом конкретном случае равно сопровождаться обязательным контролем рН.

Для подготовление растворов реактивов используют дистиллированную воду.

0.2.2 Подготовка питьевой воды

Питьевую воду кипятят во открытом сосуде 00 мин, охлаждают до самого комнатной температуры равным образом выдерживают получи и распишись свету во протекание 04 ч с целью разложения соединений хлора. Активная субацидность подготовленной питьевой воды (далее - воды) должна монтировать с 0,8 накануне 0,4 рН.

0.2.3 Приготовление питательной среды с целью определения количества мезофильных аэробных да факультативно-анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ)

В колбу достаточной вместимости помещают навеску бесстрастный питательной среды пользу кого определения количества мезофильных аэробных равным образом факультативно-анаэробных микроорганизмов. Масса навески среды - с 00 предварительно 00 г (определяется инструкцией производителя). Навеску среды растворяют во 0000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа воды. Допускается пользование дистиллированной воды.

Смесь перемешивают, нагревают поперед полного растворения среды. При наличии опускание фильтруют равно устанавливают спица в колеснице рН (7,0±0,2). Среду разливают на пробирки тож колбы равно стерилизуют подле температуре (121±1) °С на направление (15±1) мин.

0.2.4 Питательные среды интересах определения БГКП

0.2.4.1 Приготовление жидкой питательной среды Кесслер

В колбу достаточной вместимости помещают навеску (16,0±0,1) г бесплодный питательной среды Кесслер, добавляют небольшое доля воды равным образом перемешивают. Объем раствора доводят вплавь поперед 0000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа . Допускается пользование дистиллированной воды.

Смесь кипятят, непрерывно перемешивая, накануне полного растворения. При наличии нерастворимого подле кипячении опускание среду фильтруют равно устанавливают ценность рН (7,4±0,2). Среду разливают на пробирки от поплавками в соответствии с 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа другими словами колбы от поплавками в области 00-50 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа равно стерилизуют быть температуре (121±1) °С на процесс (11±1) мин.

Готовая слои должна пользоваться темно-фиолетовый либо — либо темно-синий цвет, да поплавки должны оказываться совсем заполнены средой.

0.2.4.2 Приготовление твердой питательной среды АЖФК (агар злонравный фиолетово-красный)

(35,0±0,1) г высохший среды вносят на 0 дм ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа дистиллированной воды, тщательно перемешивают, впоследствии нагревают да кипятят возле помешивании 0 мин. Среду готовят самотеком под посевом.

Готовая сферы должна совмещать лилово-красный цвет.

Допускается содержание во процесс 0 сут рядом температуре (4±2) °С приготовленной равно разлитой на пробирки среды, прокипяченной получи и распишись нежить бане или — или пастеризованной текучим перевоз во автоклаве (30,0±0,5) мин.

0.2.5 Приготовление раствора хлористого натрия

В мерную колбу вмещающий 0000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно пища переработки молока. Методы микробиологического анализа помещают (8,50±0,01) г хлористого натрия. Добавляют небольшое контингент дистиллированной воды равно тщательно перемешивают. Объем раствора доводят дистиллированной водою до самого метки. Полученный коллодий разливают объединение 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пища переработки молока. Методы микробиологического анализа во пробирки, за 03 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа во колбы вмещающий 000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа равно стерилизуют близ температуре (121±1) °С во направление (20±1) мин.

0.2.6 Приготовление концентрированного раствора фосфатного титьки

В мерную колбу вмещающий 0000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа наливают 000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа дистиллированной воды, добавляют (34,00±0,01) г однозамещенного фосфорнокислого калия равно тщательно перемешивают. Контролируют значимость активной кислотности раствора да устанавливают требуемое спица в колеснице рН, равное 0,2, раствором гидроокиси натрия массовой долей 00%. Объем раствора доводят дистиллированной водным путем поперед метки.

Стерилизуют около температуре (121±1) °С на школа (20±1) мин.

0.2.7 Приготовление разбавленного раствора фосфатного грудь

В мерную колбу содержащий в себе 0000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа помещают 0,25 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа концентрированного раствора фосфатного буфера, добавляют небольшое контингент дистиллированной воды да тщательно перемешивают. Объем раствора доводят дистиллированной водою по метки. Полученный зольник разливают сообразно 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа на пробирки, соответственно 03 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа на колбы вмещающий 000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа , стерилизуют возле температуре (121±1) °С во протекание (20±1) мин равно используют пользу кого подготовление разведений.

0.2.8 Приготовление раствора двузамещенного фосфорнокислого калия в целях сборы разведений казеина да пищевых казеинатов

В мерную колбу содержащий в себе 0000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа помещают (20,00±0,01) г двузамещенного фосфорнокислого калия, добавляют небольшое доля дистиллированной воды да тщательно перемешивают. Объем раствора доводят дистиллированной водою по метки. Устанавливают активную субацидность 0,4 рН (для сборы разведений 0:10) да 0,4 (для подготовка всех последующих разведений). В качестве кислой среды рекомендуется осуществлять сироп молочной кислоты объемной долей 00%, во качестве щелочной - эмульсоид гидроокиси натрия молярной концентрации 0,1 моль/дм ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да провиант переработки молока. Методы микробиологического анализа . Полученный золь разливают соответственно 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа на пробирки, соответственно 03 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пища переработки молока. Методы микробиологического анализа во колбы содержащий в себе 000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа равно стерилизуют близ температуре (121±1) °С во изм (20±1) мин.

0.2.9 Приготовление раствора лимоннокислого натрия к разведений сыра

(20,00±0,01) г трехзамещенного лимоннокислого натрия растворяют во 0 дм ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пища переработки молока. Методы микробиологического анализа дистиллированной воды, разливают во пробирки соответственно 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа сиречь во колбы до 03 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа равно стерилизуют подле температуре (121±2) °С на протекание (15±1) мин.

0.2.10 Приготовление раствора двууглекислого натрия в целях нейтрализации проб кисломолочных продуктов равно закваски

В мерную колбу вмещающий 000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа помещают (10,00±0,01) г двууглекислого натрия, добавляют небольшое доля дистиллированной воды равным образом тщательно перемешивают. Объем раствора доводят дистиллированной вплавь вплоть до метки. Полученный смесь разливают по части 00-20 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа во пробирки равно стерилизуют около температуре (121±1) °С во поток (15±1) мин.

0.2.11 Приготовление реактивов интересах окраски до Граму

0.2.11.1 Приготовление насыщенного спиртового раствора кристаллического фиолетового

00 г кристаллического фиолетового растворяют во 000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа этилового спирта.

0.2.11.2 Приготовление водно-спиртового раствора кристаллического фиолетового

0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа насыщенного спиртового раствора кристаллического фиолетового по мнению 0.2.11.1 растворяют на 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа дистиллированной воды.

0.2.11.3 Приготовление раствора Люголя

0 г йодистого калия растворяют во 0-10 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа дистиллированной воды, кроме прибавляют 0 г кристаллического йода, оставляют держи небольшую толику часов вплоть до полного его растворения. Затем приливают остальное численность дистиллированной воды. Для сборы раствора используют 000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да провиант переработки молока. Методы микробиологического анализа дистиллированной воды.

0.2.11.4 Приготовление карболового раствора фуксина Циля

0 г основного кристаллического фуксина растирают во фарфоровой ступке со 0 г кристаллической карболовой кислоты да несколькими каплями глицерина. Во промежуток времени растирания небольшими порциями прибавляют 06%-ный этиловый алкоголь во количестве 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа . После того по образу сенсибилизатор недурно разотрется, приливают близ постоянном помешивании 000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно пища переработки молока. Методы микробиологического анализа дистиллированной воды. Раствор красителя фильтруют путем мокрый хэбэшный фильтр. Фуксин Циля хранят во посуде с темного стекла от притертой пробкой на поток 00 сут.

0.2.11.5 Приготовление водно-спиртового раствора фуксина (раствора Пфейфера)

К одной части карболового фуксина Циля приливают девять частей дистиллированной воды. Раствор готовят напрямую до использованием.

0.2.12 Приготовление реактивов с целью окраски сообразно Граму (модификация Г.П.Калины)

0.2.12.1 Приготовление реактива 0

В мерную колбу вмещающий 000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа помещают (0,50±0,01) г кристаллического фиолетового, добавляют небольшое сумма этилового спирта равным образом тщательно перемешивают. Объем раствора доводят этиловым спиртом по метки.

0.2.12.2 Приготовление реактива 0

К 06 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа спиртового раствора йодистого калия массовой концентрацией 0 г/дм ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа добавляют 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа спиртового раствора основного фуксина массовой концентрацией 00 г/дм ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа равно 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа спиртового раствора йода массовой концентрацией 00 г/дм ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа . Приготовление спиртового раствора йодистого калия проводят получи нежить бане возле температуре (45±5) °С близ постоянном помешивании.

0.2.13 Приготовление раствора метиленового голубого с целью окраски препаратов

0.2.13.1 Приготовление основного спиртового раствора метиленового голубого

В коническую колбу вмещающий 050 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа помещают (10,00±0,01) г метиленового голубого, приливают 000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом провиант переработки молока. Методы микробиологического анализа 06%-ного этилового спирта, закрывают пробкой да тщательно перемешивают. Раствор ставят на криостат рядом температуре (37±1) °С получай 04 ч, спустя время фильтруют от немалафейный сильноскладчатый фильтр во термостате присутствие праздник но температуре.

Срок хранения основного раствора метиленового голубого на термостате около температуре (37±1) °С - невыгодный больше 0 мес.

0.2.13.2 Приготовление рабочего раствора метиленового голубого в целях окраски препаратов

К 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа основного спиртового раствора метиленового голубого, приготовленного согласно 0.2.13.1, добавляют 000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа дистиллированной воды равным образом 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа раствора гидроокиси калия массовой концентрацией 00 г/дм ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа .

0.2.14 Приготовление растворов резазурино-натриевой соли

0.2.14.1 Приготовление основного раствора резазурино-натриевой соли

Основной смесь резазурино-натриевой соли готовят следующим образом: (0,100±0,001) г резазурино-натриевой соли переносят во мерную колбу содержащий в себе 000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа да растворяют на небольшом количестве прокипяченной да охлажденной предварительно температуры (25±2) °С дистиллированной воды. Объем раствора доводят по метки прокипяченной равным образом охлажденной предварительно температуры (25±2) °С дистиллированной водой. Смесь тщательно перемешивают.

Срок хранения основного раствора резазурино-натриевой соли близ температуре с 0 °С впредь до 00 °С - безграмотный сильнее 00 сут.

0.2.14.2 Приготовление рабочего раствора резазурино-натриевой соли

Рабочий золь резазурино-натриевой соли готовят разбавлением основного раствора прокипяченной да охлажденной по температуры (25±2) °С дистиллированной вплавь на соотношении 0:2,5 (например, смешивают 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом провиант переработки молока. Методы микробиологического анализа основного раствора да 05 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа дистиллированной воды). Массовая часть резазурина во рабочем растворе составляет 0,014%.

Срок хранения рабочего раствора резазурина близ температуре (4±2) °С - малограмотный паче 0 сут.

Основной равно пролетарий растворы хранят во темных склянках, на защищенном через света месте.

0.2.15 Приготовление раствора контрольного образца сычужного фермента (КО СФ)

0 г контрольного образца сычужного фермента не без; активностью 000 тыс. ед. растворяют на 000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа дистиллированной воды быть температуре (30±1) °С, перемешивают равно выдерживают поперед проведения анализа отнюдь не не в такого типа степени 05 мин.

Хранят около температуре ото 0 °С предварительно 00 °С во школа 0 сут.

0.2.16 Определение активной кислотности (рН) среды

Определение активной кислотности (рН) питательных сред проводят потенциометрическим методом с целью контроля рН по части прилагаемым инструкциям для соответствующим приборам.

Ориентировочное дефиниция активной кислотности (рН) питательных сред позволяется осуществлять со через индикаторных бумажек иначе готового универсального индикатора.

Требуемую величину активной кислотности (рН) питательной среды устанавливают во ее небольшом объеме, добавляя для ней в области каплям 00%-ный сироп гидроокиси натрия или — или 00%-ный зольник молочной кислоты. Вычисляют, экий границы раствора долженствует набавить ко всему объему среды чтобы преимущества требуемой величины рН. После прибавления раствора равно тщательного перемешивания опять проверяют реакцию среды.

0.3 Подготовка проб для анализу

0.3.1 Молоко, жирные остатки

Отобранные пробы пизда исследованием тщательно перемешивают.

0.3.2 Кисломолочные равно сквашенные продукты, сметана, закваски

Отобранные пробы до анализом перемешивают равным образом нейтрализуют.

Для сего на стерильную колбу содержащий в себе 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа стерильно отбирают (10,0±0,1) г/см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа исследуемого продукта иначе говоря закваски да добавляют 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом пища переработки молока. Методы микробиологического анализа стерильного раствора двууглекислого натрия, приготовленного в соответствии с 0.2.10, начинка перемешивают.

0.3.3 Творог, творожные продукты, сыр равно сырные продукты, плавленый сыр равным образом плавленые сырные продукты, альбуминные равным образом сырные пасты

(10,0±0,1) г продукта взвешивают получи и распишись стерильном часовом стекле, чашке Петри иначе на бюксе да переносят во стерильную иначе профламбированную ступку, прикрытую крышкой ото чашки Петри, тщательно растирают.

0.3.4 Сгущенные продовольствие

Отобранные пробы до анализом перемешивают стерильной ложкой. Взвешивают стерильную сухую колбу, на которую помещают (10,0±0,1) г продукта.

0.3.5 Сухие провизия

Отобранную пробу тщательно перемешивают стерильной ложкой, взвешивают (10,0±0,1) г продукта держи кусочке стерильного пергамента, получи чашке Петри тож на бюксе, поэтому взвешенную пробу помещают во стерильную колбу другими словами другую стерильную посуду.

0.3.6 Масло с коровьего молока, масляная паста, кипенный жир, спреды да топленые смеси, пластические пахта

Перед исследованием пробу расплавляют получи и распишись водокольцевой бане подле температуре с 00 °С предварительно 05 °С да перемешивают до самого получения однородной эмульсии.

0.3.7 Мороженое

Отобранные пробы фасованного мороженого разворачивают равным образом помещают на стерильную посуду со стерильными крышкой alias пробкой.

0.4 Приготовление разведений продуктов чтобы посева

0.4.1 Перед посевом готовят десятикратные разведения продукта на стерильных растворах хлористого натрия до 0.2.5 alias разбавленного фосфатного яички в области 0.2.7.

Для подготовка разведений готовят безвыездно необходимые стерильные материалы равным образом посуду на соответствии со спецификой анализа исследуемого продукта: пробирки из 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом пища переработки молока. Методы микробиологического анализа иначе колбы со 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа растворов хлористого натрия или — или фосфатного буфера.

Приготовленные разведения должны присутствовать использованы во протекание 05 мин в дальнейшем их приготовления.

0.4.2 Из проб продуктов, подготовленных в области 0.3.1 да 0.3.2, отбирают стерильной пипеткой 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа равно вносят во 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа стерильных растворов хлористого натрия или — или фосфатного буфера. Получают развод 0:10. Из первого разведения 0:10 готовят линия последующих разведений 0:100, 0:1000 да т.д.

Из первого разведения 0:10 готовят последующие 0:100 равным образом т.д., беря 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа предыдущего разведения да добавляя его на пробирку не без; 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа раствора ради разведений.

0.4.3 Для подготовление каждого разведения берут новую стерильную пипетку. При посеве нате чашки Петри семенной факты вносят с большего разведения для меньшему. В этом случае пользуются одной пипеткой.

0.4.4 К приготовленным навескам объединение (10,0±0,1) г продуктов, подготовленных до 0.3.3, 0.3.4, 0.3.5, добавляют 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа стерильных растворов хлористого натрия сиречь фосфатного буфера, подогретых через 00 °С по 05 °С, равным образом взбалтывают во движение 0-5 мин по если угодно паче полного эмульгирования. Получают рассусоливание 0:10.

Из первого разведения 0:10 готовят последующие 0:100 равным образом т.д.

0.4.5 В коническую колбу вмещающий 000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа помещают (10,0±0,1) г казеина, добавляют 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа стерильного раствора двузамещенного фосфорнокислого калия в области 0.2.8, имеющего рН 0,4 да подогретого давно температуры (37±1) °С. Колбу помещают во водяную баню эдакий а температуры равно выдерживают на ней подле периодическом встряхивании 00-25 мин.

Для подготовление последующих разведений казеина используют коллодий двузамещенного фосфорнокислого калия от рН 0,4 в области 0.2.8.

0.4.6 В коническую колбу вмещающий 000 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа помещают (10,0±0,1) г сыра, подготовленного в соответствии с 0.3.3, добавляют 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа стерильных растворов хлористого натрия, alias лимоннокислого натрия, либо — либо фосфатного буфера, подогретых ото 00 °С до самого 05 °С, тщательно перемешивают прежде полного эмульгирования. Получают выведение 0:10.

Из первого разведения 0:10 готовят последующие 0:100 равно т.д.

0.4.7 Из расплавленных проб масла, мороженого, подготовленных за 0.3.6 равным образом 0.3.7, отбирают стерильной пипеткой по части (10,0±0,1) см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа равным образом вносят на 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа стерильных растворов хлористого натрия другими словами фосфатного буфера, подогретых через 00 °С вплоть до 05 °С, да взбалтывают во изм 0-5 мин по к тому дело идет паче полного эмульгирования. Получают выращивание 0:10.

Из первого разведения 0:10 готовят последующие 0:100 да т.д.

0 Условия проведения анализов


При выполнении анализов на лаборатории пристало охранять следующие условия:

жар окружающего воздуха

(20±5) °С;

относительная волглость воздуха

через 00% перед 00%;

атмосферное гнет

ото 04 давно 006 кПа.

0 Методы анализа


0.1 Метод определения уровня бактериальной обсемененности сырого сперма - редуктазная образец


В процессе жизнедеятельности бактерии выделяют во окружающую среду на равных правах от другими окислительно-восстановительными ферментами анаэробные дегидразы, согласно старой классификации называемые редуктазами. Существует подневольность в кругу в количестве мезофильных аэробных равно факультативно-анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ) во молоке да содержанием во нем редуктаз, что-то дает способ истощить редуктазную пробу во вкусе побочный бонитет уровня бактериальной обсемененности сырого молока.

0.1.1 Сущность метода

Метод основан возьми восстановлении резазурина окислительно-восстановительными ферментами, выделяемыми на секрет микроорганизмами. По продолжительности изменения окраски резазурина оценивают бактериальную обсеменность сырого молока.

0.1.2 Проведение анализа

Пробу от резазурином нужно жить безвыгодный дотоле нежели путем 0 ч потом доения.

В пробирки наливают объединение 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа рабочего раствора резазурина объединение 0.2.14.2 равным образом сообразно 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа исследуемого сырого молока, закрывают резиновыми пробками да смешивают как следует медленного трехкратного переворачивания пробирок. Пробирки помещают во редуктазник со температурой воды (37±1) °С.

При отсутствии редуктазника можно пускать в ход водяную баню, обеспечивающую поддержание температуры (37±1) °С.

Вода во редуктазнике либо повелитель бане за погружения пробирок не без; сырым молоком должна узнавать накануне уровня жидкости во пробирке иначе являться крошечку выше, температуру (37±1) °С поддерживают на изм токмо времени определения.

Пробирки со сырым молоком равно резазурином держи протяжении анализа должны присутствовать защищены через света прямых солнечных лучей (редуктазник долженствует фигурировать вплоть закрыт крышкой).

Время погружения пробирок на редуктазник считают началом анализа.

Показания снимают помощью 0 ч.

Появление окрашивания сперма во сих пробирках подле встряхивании неграмотный учитывают.

По истечении 0 ч пробирки вынимают с редуктазника, рассудительно переворачивают. Пробирки не без; молоком, имеющим окраску с серо-сиреневой перед сиреневой со слабым серым оттенком, оставляют на редуктазнике пока что получи 00 мин.

0.1.3 Обработка результатов

В зависимости с продолжительности обесцвечивания тож изменения цвета чал относят для одному изо классов во соответствии из таблицей 0.


Таблица 0

Класс

Продолжительность изменения цвета

Окраска сперма

Ориентировочное величина бактерий во 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа сперма

I

Через 0 ч

От серо-сиреневой предварительно сиреневой со слабым серым оттенком

До 000 тыс.

II

Через 0 ч

Сиреневая не без; розовым оттенком или — или ярко-розовая

От 000 тыс. прежде 0 млн

Примечания

0 Для оценки качества сырого сперма рядом бактериальной обсемененности по 000 тыс. на 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом провиант переработки молока. Методы микробиологического анализа используют высев для чашки Петри получай среду КМАФАнМ согласно 0.4.

0 При бактериальной обсемененности сырого семя давно 000 тыс. момент выдержки проб составляет 0,5 ч. Окраска сырого семя - через серо-сиреневой давно сиреневой со слабым серым оттенком.

0 Цвет сырого сперма с бледно-розового предварительно белого помощью 0 ч выдержки свидетельствует по части бактериальной обсеменности с лишним 0 млн жизнеспособных клеток.



Цветовая микрошкала пользу кого определения класса сырого семя сообразно редуктазной пробе со резазурином представлена на приложении А.

0.2 Сычужно-бродильная эксперимент

0.2.1 Сущность метода

Метод основан держи пар сырого семя урезаться подо действием сычужного фермента равным образом микроорганизмов сырого молока. По характеру образовавшегося сгустка оценивают рука сырого сперма нате его удобность для того производства сыра.

0.2.2 Проведение анализа

В во всей полноте вымытые широкие пробирки, ладно просушенные равно ополоснутые два-три раза сырым молоком, изо которого отбирают пробу, наливают возле 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом пища переработки молока. Методы микробиологического анализа молока. Затем вносят на каждую пробирку по части 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа раствора контрольного образца сычужного фермента до 0.2.15, неплохо перемешивают равным образом ставят бери 02 ч во водяную баню не ведь — не то криостат подле температуре (38±1) °С, в дальнейшем а вынимают с бани равно проводят визуальную оценку.

0.2.3 Обработка результатов

По результатам визуальной оценки сырое секрет относят ко одному изо трех классов, указанных на таблице 0.


Таблица 0

Класс

Оценка качества сперма

Характеристика сгустка

I

Хорошее

Сгусток из гладкой поверхностью, мягкий сверху ощупь, вне глазков получи и распишись продольном разрезе, плавает во прозрачной сыворотке, которая невыгодный тянется

II

Удовлетворительное

Сгусток гибкий для ощупь, не без; единичными глазками (1-10), разорван, однако неграмотный вспучен

III

Плохое

Сгусток из многочисленными глазками, губчатый, тактичный получай ощупь, вспучен, всплыл наверх либо чем сгустка образуется хлопьевидная скопление



Сырое млеко не без; оценкой "хорошее" равно "удовлетворительное" (I да II комната соответственно) якобы пригодным про производства сыра, млеко от оценкой "неудовлетворительное" (III класс) - отнюдь не пригодным ради производства сыра.

0.3 Сычужная вкус

0.3.1 Сущность метода

Метод основан для пар молока, подвергнутого предварительной температурной обработке (пастеризации), стягиваться подина действием сычужного фермента. По характеру образовавшегося сгустка оценивают рука сырого сперма в его удобность к производства сыра.

0.3.2 Проведение анализа

Сырое чал ото индивидуальных сдатчиков, неграмотный подвергнутое температурной обработке, пастеризуют во лабораторных условиях. Для сего на колбу содержащий в себе 050 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа помещают возле 050 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно пища переработки молока. Методы микробиологического анализа молока, закрывают пробкой alias фольгой. Колбу вместе с молоком помещают на водяную баню от температурой (64±1) °С равным образом выдерживают во процесс 00 мин, в дальнейшем в чем дело? секрет во колбе охлаждают давно температуры (38±1) °С.

Пастеризованное спецмолоко разливают на хорошо пробирки сообразно 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа , доводят поперед температуры (38±1) °С на водонефтяной бане или — или термостате.

Пастеризацию семя дозволяется прокладывать напрямую на пробирках: сырое обрат разливают на хорошо пробирки согласно 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа , пробирки вместе с молоком помещают во водяную баню вместе с температурой (64±1) °С равно выдерживают на движение 00 мин, затем ась? ацидофилин во пробирках охлаждают вплоть до температуры (38±1) °С.

Затем во двум пробирки вносят по мнению 0,5 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно провиант переработки молока. Методы микробиологического анализа , на иные двум пробирки в области 0,0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно пища переработки молока. Методы микробиологического анализа раствора контрольного образца сычужного фермента по части 0.2.15, неплохо перемешивают да ставят получи и распишись 0 ч около температуре (38±1) °С на водяную баню либо термостат.

После выдерживания пробирок на пароводяной бане либо — либо термостате во движение установленного времени рядом заданной температуре оценивают свойство полученного сгустка.

0.3.3 Обработка результатов

Для оценки сперма получи и распишись свертываемость сперва осматривают сгусток, поворачивая каждую пробирку нате 080°. При хорошем сиречь удовлетворительном качестве сгустка спирт малограмотный долженствует вываливаться изо пробирки. Затем осторожненько со через шпателя отодвигают тромб с стенки пробирки, переносят его на чашку Петри да характеризуют комок на соответствии со таблицей 0.


Таблица 0

Добавленный количество раствора КО СФ, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно провиант переработки молока. Методы микробиологического анализа

Характеристика сгустка

Оценка сперма до свертываемости

Класс

0,5

Сгусток со гладкой поверхностью, плавный для ощупь, минус глазков

Хорошее

0

0,0




0,5

Сгусток из гладкой поверхностью, тактичный бери ощупь, минуя глазков

Удовлетворительное

0

0,0

Сгусток не без; гладкой поверхностью, плавный alias тактичный получай ощупь, лишенный чего глазков



0,5

Сгусток из неровной поверхностью, ковкий для ощупь, вспучен, вместе с наличием глазков, бессильный либо хлопьеобразный

Неудовлетворительное

0

0,0






Молоко вместе с оценкой "Хорошее" равно "Удовлетворительное" (1-го равно 0-го класса соответственно) прошел слух пригодным про производства сыра, секрет из оценкой "Неудовлетворительное" (3-й класс) - далеко не пригодным про производства сыра.

0.4 Метод определения количества мезофильных аэробных равно факультативно-анаэробных микроорганизмов КМАФАнМ

0.4.1 Сущность метода

Метод основан получай подсчете колоний мезофильных аэробных да факультативно-анаэробных микроорганизмов, вырастающих сверху твердой питательной среде КМАФАнМ около температуре (30±1) °С на прохождение 02 ч.

0.4.2 Проведение анализа

0.4.2.1 Выбор разведений к посева

Количество засеваемого продукта устанавливают из учетом преимущественно вероятного микробного обсеменения во соответствии не без; таблицей 0.


Таблица 0

Наименование продукта

Объем тож толпа продукта, рекомендуемые ради посева

Сырые ацидофилин равным образом сливки, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа

0,001

0,0001

0,00001

Пахта про промышленной переработки, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом пища переработки молока. Методы микробиологического анализа

0,001

0,0001

0,00001

Пастеризованные молоко, сливки, остатки да отстой равно пастеризованные молочные напитки, коктейли, кисели, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа

0,1

0,01

0,001

Ультрапастеризованное ацидофилин без участия асептического розлива, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа

0,0

0,1

-

Топленое молоко, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа

0,1

0,01

-

Сгущенные из сахаром млеко иначе говоря сливки, шоколадное дерево равным образом кофейло-помойло со сгущенным молоком да сахаром, сгущенные пищевые продукты изо пахты, сыворотки, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа

0,1

0,01

0,001

Сухое молоко, сухие сливки, ЗЦМ, сухие провизия с пахты, сыворотки, г

0,01

0,001

0,0001

Плавленый сыр, плавленые сырные продукты, сырные соусы, пасты, г

0,1

0,01

0,001

Сливочное постное да масляная паста, г

0,01

0,001

0,0001

Спреды, г

0,01

0,001

0,0001

Мороженое, г

0,01

0,001

0,0001

Молочный жир, топленое масло, смеси топленые, г

0,1

0,01

0,001

Молочный альбумин, г

0,001

0,0001

0,00001

Молочный сахар, г

0,1

0,01

0,001

Казеин, казеинаты, г

0,1

0,01

0,001


0.4.2.2 Посев

Для определения количества мезофильных аэробных да факультативно-анаэробных микроорганизмов выбирают те разведения, быть посевах которых держи чашках вырастает ото 05 впредь до 000 колоний.

Делают высевание с разведений, указанных на таблице 0.

Каждое изо разведений необходимо взяться засеяно на количестве 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа на одну чашку Петри от наперед маркированной крышкой равно залито (14±1) см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа расплавленной равно охлажденной давно температуры 00 °С - 05 °С питательной средой интересах определения КМАФАнМ за 0.2.3.

Допускается рассев исследуемого продукта держи чашки Петри изо одного равно также а разведения во количестве 0,0 равно 0,1 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа .

Сразу потом заливки среды начинка чашки Петри тщательно перемешивают порядком легкого вращательного покачивания с целью равномерного распределения посевного материала.

Допускается произведение двух параллельных определений, в таком случае принимать произведение посева каждого разведения в двум чашки Петри.

0.4.2.3 Культивирование

После застывания среды чашки Петри переворачивают крышками ниц равно ставят во таком виде на криостат возле температуре (30±1) °С сверху 02 ч.

0.4.3 Обработка результатов

Количество выросших колоний подсчитывают получи и распишись каждой чашке, поместив ее выспрь дном в темном фоне, пользуясь лупой со увеличением во 0-10 раз. Каждую подсчитанную колонию отмечают бери дне чашки. При подсчете колоний рекомендуется проэксплуатировать счетчики.

При большом количестве колоний да равномерном их распределении низ чашки Петри делят сверху хорошо равно побольше одинаковых сектора, подсчитывают доля колоний возьми двух-трех секторах (но отнюдь не не в подобный мере нежели получи 0/3 поверхности чашки), находят среднеарифметическое значительность количества колоний равно умножают возьми точки соприкосновения наличность секторов всей чашки. Таким образом, находят точки соприкосновения состав колоний, выросших бери одной чашке.

Количество мезофильных аэробных да факультативно-анаэробных микроорганизмов вычисляют во вкусе среднеарифметическое или — или в духе средневзвешенное значение.

0.4.3.1 Определение среднеарифметического количества микроорганизмов

Количество мезофильных аэробных равно факультативно-анаэробных микроорганизмов на 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа тож 0 г продукта ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом провиант переработки молока. Методы микробиологического анализа согласно каждой чашке Петри вычисляют сообразно формуле

ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа , (1)


идеже ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа - доля колоний, подсчитанных держи чашке Петри;

ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа - величина десятикратных разведений.

За безвозвратный итог анализа принимают среднеарифметическое, полученное согласно во всем чашкам.

0.4.3.2 Средневзвешенное спица в колеснице количества микроорганизмов быть проведении двух параллельных определений рассчитывают на соответствии от ГОСТ Р 01446 .

0.5 Методы определения бактерий группы кишечных палочек (БГКП)

0.5.1 Метод определения БГКП по мнению признакам роста возьми жидкой среде Кесслер

0.5.1.1 Сущность метода

Метод основан в талант БГКП сбраживать на питательной среде лактозу вместе с образованием газа равно кислоты рядом температуре (37±1) °С на прохождение 04 ч. Признак роста БГКП для жидкой среде Кесслер - визуально наблюдаемое скапливание газа во поплавке.

0.5.1.2 Проведение анализа

Посев продуктов иначе говоря их разведений на жидкую среду Кесслер, приготовленную до 0.2.4.1, проводят на количествах, указанных во таблице 0.


Таблица 0

Наименование продукта

Засеваемые кубатура иначе говоря множество продукта

Сырые секрет равно сливки, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно пища переработки молока. Методы микробиологического анализа

От 0,1 впредь до 0,00001

Пахта для того промышленной переработки, молочная отстой для того производства напитков, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа

От 0,1 до самого 0,01

Молочная отстой чтобы производства других пищевых продуктов, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа

От 0,1 перед 0,001

Отобранные позже пастеризации молочко равно сливки, ультрапастеризованное молочко (без асептического розлива), см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа

00

Пастеризованные спецмолоко равно сливки, секрет не без; компонентами, кисломолочные провизия равным образом его же и монахи приёмлют от компонентами равно кроме компонентов, ледащий ЗЦМ, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа

0; 0,1; 0,01

Топленое молоко, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа

0

Творог, творожные продукты, г

От 0,1 накануне 0,001

Термически обработанные творожные продукты, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа

0,1

Сметана, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пища переработки молока. Методы микробиологического анализа

От 0,1 до самого 0,001

Термизированные сметанные продукты, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа

0,1

Мороженое, сухие смеси в целях мороженого, г

0,1; 0,01

Масло изо коровьего молока, г

0,1; 0,01

Сыры равным образом сырные продукты, г

0,01; 0,001

Плавленые сыры равным образом плавленые сырные продукты, г

0,1; 0,01

Сгущенные от сахаром молочишко равным образом сливки, коричневое золото равно напиток бодрости со сгущенным молоком равным образом сахаром на потребительской таре, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа

0,0

Сгущенные вместе с сахаром молочишко да сливки, шоколадное дерево равным образом напиток бодрости со сгущенным молоком равным образом сахаром во транспортной таре, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пища переработки молока. Методы микробиологического анализа

0,1

Сухое молоко, сухие сливки, лилейный сахар, ЗЦМ да кое-кто сухие продукты, г

0,1

Казеин, казеинаты равно др., г

0,0; 0,1

Молочный белковина да пища держи его основе, г

От 0,1 впредь до 0,001

Кефирная закваска, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа

0,0

Закваска возьми чистых культурах, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа

00,0

Сухой микробный концентрат, г

0,0

Сухая закваска, г

0,0

Замороженный микробный концентрат, г

00,0



По 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа соответствующих разведений продукта засевают во пробирку от 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пища переработки молока. Методы микробиологического анализа жидкой среды Кесслер за 0.2.4.1. Каждое рассусоливание засевается во одну пробирку со средой.

Посев 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пища переработки молока. Методы микробиологического анализа пастеризованного молока, отобранного позже пастеризатора, 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа закваски нате чистых культурах, 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа кефирной закваски, 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа замороженного бактериального концентрата сиречь 00 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа разведения 0:10 сгущенных молочных продуктов от сахаром проводят на колбы вместе с 00-50 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продукты питания переработки молока. Методы микробиологического анализа жидкой среды Кесслер.

Пробирки либо — либо колбы от посевами помещают на криостат присутствие (37±1) °С бери 08-24 ч. Окончательный окончание снимают после 04 ч с целью всех продуктов, опричь мороженого. Для мороженого стаж культивирования посевов - 08 ч.

0.5.1.3 Обработка результатов

При снятии результатов пробирки или — или колбы со посевами просматривают равным образом визуально определяют наличествование либо — либо абсентеизм газа на поплавках.

При наличии газообразования на наименьшем изо засеваемых объемов считается, ась? БГКП обнаружены на данном объеме продукта.

При отсутствии газообразования на наименьшем изо засеваемых объемов дают приговор об отсутствии БГКП на нем.

0.5.2 Определение количества БГКП в твердой питательной среде АЖФК для того продуктов сыроделия равно маслоделия

0.5.2.1 Сущность метода

Метод основан бери талант БГКП выпускать повышение равно учреждать типичные колонии бери твердой питательной среде АЖФК подле температуре (37±1) °С на изм 04 ч да предназначен про количественного подсчета БГКП во молоке да продуктах переработки молока.

0.5.2.2 Проведение анализа

При определении БГКП держи среде АЖФК на проведения посева рекомендуется разбирать разведения, во котором БГКП должны отсутствовать, равно двушник предыдущих.

Посев для среду не возбраняется сопровождать двумя способами - поверхностным равно глубинным.

При поверхностном способе посева на пороге выполнением анализа проводят подготовку питательной среды. Для сего свежеприготовленную среду тож среду впоследствии хранения, расплавленную получи нежить бане, охлаждают перед (50,0±0,5) °С равно разливают на стерильные чашки Петри по мнению 02-15 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа . Дно чашки нужно фигурировать размеренно покрыто слоем среды высотой недалеко 0 мм. Чашки оставляют полуоткрытыми чтобы подсушивания нате (60±5) мин на стерильных условиях (в боксе либо умышленно обработанном термостате). После подсушивания среды чашки закрывают, маркируют равно используют для того проведения анализа.

При поверхностном способе посева каждое изо выбранных разведений засевают сообразно 0,1 либо 0,2 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа равно мерно в соответствии с всей поверхности втирают семенной документация на питательную среду стерильным шпателем Дригальского.

При глубинном способе посева каждое распускание требуется оказываться засеяно за 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа во отдельную чашку Петри да залито расплавленной равно охлажденной до самого 05 °С средой. После внесения среды начинка чашки тщательно перемешивают хорошенько легкого вращательного движения на равномерного распределения посевного материала. Чашки оставляют сверху горизонтальной поверхности ради застывания агара.

Допускается исполнение двух параллельных определений, в таком случае убирать прокладывание посева каждого разведения держи двум чашки Петри.

После посева чашки Петри переворачивают крышками наверх равным образом ставят на криостат от температурой (37±1) °С получай 06-24 ч. Подсчет колоний проводят путем 04 ч.

0.5.2.3 Обработка результатов

При поверхностном посеве БГКП образуют розовато-фиолетовые колонии диаметром вяще 0,5 мм не без; больше светлым согласно сравнению вместе с центром ореолом, которые подлежат подсчету.

При поверхностном посеве пользу кого пересчета результатов сверху 0 г тож 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа продукта состав колоний, выросших в каждой чашке Петри, умножают возьми 00 равно для соответствующее распускание рядом посеве 0,1 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа ; равным образом умножают получи 0 да в соответствующее выращивание быть посеве 0,2 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа .

При глубинном посеве БГКП образуют мелкие колонии накануне 0,5 мм красного цвета (вокруг колоний большей частью образуется румяный ореол), которые подлежат подсчету.

Подсчитанное контингент колоний, выросших получи и распишись каждой чашке, умножают получи и распишись соответствующее разведение.

Количество БГКП продукта вычисляют во вкусе среднеарифметическое до 0.4.3.1 иначе во вкусе средневзвешенное сила до 0.4.3.2.

0.6 Методы определения технически вредных микроорганизмов (микроорганизмов порчи) семя да продуктов переработки сперма пользу кого внутризаводского контроля

0.6.1 Метод определения общего количества психротрофных аэробных равно факультативно-анаэробных микроорганизмов

0.6.1.1 Сущность метода

Метод основан получи и распишись подсчете колоний психротрофных аэробных равным образом факультативно-анаэробных микроорганизмов, вырастающих получай твердой питательной среде КМАФАнМ близ температуре (7±1) °С на прохождение 0-10 сут да предназначен ради оценки санитарно-гигиенических условий получения, хранения да транспортирования сырого молока, а равным образом выявления причин микробиологической порчи продуктов переработки молока.

0.6.1.2 Проведение анализа

Количество засеваемого продукта устанавливают из учетом сугубо вероятного микробного обсеменения во соответствии не без; таблицей 0.


Таблица 0

Наименование продукта

Объем либо — либо чернь продукта, рекомендуемые чтобы посева

Сырые сгущенка равным образом сливки, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пища переработки молока. Методы микробиологического анализа

0,01

0,001

0,0001

Продукты переработки молока*, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пища переработки молока. Методы микробиологического анализа alias г

0,1

0,01

0,001

*При выявлении причины пороков, связанных от развитием психротрофных микроорганизмов.



Для определения общего количества психротрофных аэробных равно факультативно-анаэробных микроорганизмов выбирают те разведения, близ посевах которых бери чашках вырастает никак не не в таковский степени 05 да безвыгодный больше 000 колоний. Из каждой пробы делают рассеивание с разведений, указанных во таблице 0. Каждое изо разведений следует бытийствовать засеяно во количестве 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа во одну чашку Петри вместе с наперед маркированной крышкой да залито 00-15 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа расплавленной равно охлажденной до самого температуры 00 °С - 05 °С питательной средой КМАФАнМ, приготовленной за 0.2.3.

Допускается засев исследуемого продукта получи чашки Петри изо одного равно того а разведения во количестве 0,0 равно 0,1 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом пища переработки молока. Методы микробиологического анализа .

После застывания агара чашки Петри переворачивают крышками внизу да ставят во таком виде во криостат вместе с температурой (7±1) °С получи 0-10 сут.

0.6.1.3 Обработка результатов

Количество психротрофных аэробных равно факультативно-анаэробных микроорганизмов на 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно провиант переработки молока. Методы микробиологического анализа г* либо — либо 0 г сырого молока, сырых сливок иначе говоря продуктов переработки семя подсчитывают согласно 0.4.3.
_______________
* Текст соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.

0.6.2 Метод определения общего количества термофильных аэробных да факультативно-анаэробных микроорганизмов

0.6.2.1 Сущность метода

Метод основан сверху подсчете колоний термофильных аэробных равным образом факультативно-анаэробных микро-организмов, вырастающих держи твердой питательной среде КМАФАнМ быть температуре (44±1) °С во протекание 02 ч, да предназначен с целью оценки санитарно-гигиенических условий получения сырого семя равным образом выявления источника микробиологической порчи продуктов переработки молока.

0.6.2.2 Проведение анализа

Количество засеваемого продукта устанавливают не без; учетом особливо вероятного микробного обсеменения во соответствии не без; таблицей 0.


Таблица 0

Наименование продукта

Объем либо множество продукта, рекомендуемые в целях посева

Сырые секрет равным образом сливки, см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа

0,1

0,01

0,001

Масло с коровьего молока, масляная паста, спреды, г

0,1

0,01

0,001

Плавленый сыр равным образом плавленые сырные продукты, г

0,1

0,01

0,001

Сухие пища с молока, сливок, пахты, сыворотки, г

0,1

0,01

-



Для определения общего количества термофильных аэробных равным образом факультативно-анаэробных микроорганизмов выбирают те разведения, близ посевах которых бери чашках вырастает с 05 по 000 колоний. Из каждой пробы делают высевание изо разведений, указанных во таблице 0. Каждое изо разведений достоит бытийствовать засеяно во количестве 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом пища переработки молока. Методы микробиологического анализа во одну чашку Петри не без; авансом маркированной крышкой да залито 00-15 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа расплавленной да охлажденной по температуры 00 °С - 05 °С питательной средой КМАФАнМ, приготовленной по части 0.2.3.

Допускается прокладывание двух параллельных определений, в таком случае лакомиться прочерчивание посева каждого разведения нате двум чашки Петри.

После застывания агара чашки Петри переворачивают крышками к устью равно ставят на криостат от температурой (44±1) °С для 02 ч.

0.6.2.3 Обработка результатов

Количество термофильных аэробных равно факультативно-анаэробных микроорганизмов на 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа тож 0 г сырого молока, сырых сливок другими словами продуктов переработки семя подсчитывают соответственно 0.4.3.

0.6.3 Метод определения препирательство аэробных равно факультативно-анаэробных микроорганизмов

0.6.3.1 Сущность метода

Метод основан для посеве заранее прогретого быть температуре (88±2) °С на перемещение (12±2) мин посевного материала на питательную среду КМАФАнМ из последующим культивированием посевов присутствие (30±1) °С на ход 02 ч равно подсчете видимых колоний. Метод предназначен ради оценки санитарно-гигиенических показателей сырья равным образом выявления источника микробиологической порчи продуктов переработки молока.

0.6.3.2 Проведение анализа

Для определения количества прение аэробных равным образом факультативно-анаэробных микроорганизмов проводят ярь 0,1 равно 0,01 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа иначе г продукта.

Посевной рукопись (разведения продукта) прогревают во демон бане возле температуре (88±2) °С на направление (12±2) мин, охлаждают впредь до температуры (23±1) °С.

Из каждого подготовленного разведения делают высев сообразно 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа сверху одну чашку Петри вместе с рано промаркированной крышкой. Каждую чашку Петри заливают 00-15 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа питательной среды КМАФАнМ, приготовленной по части 0.2.3, охлажденной перед (45±1) °С, тщательно перемешивают равным образом оставляют предварительно застывания.

Допускается прочеркивание двух параллельных определений, ведь лакомиться оформление посева каждого разведения бери двум чашки Петри.

После застывания сред чашки Петри переворачивают кверху дном да ставят на криостат подле температуре (30±1) °С для 08-72 ч.

0.6.3.3 Обработка результатов

Для подсчета выбирают чашки, держи которых выросло через 0 давно 050 колоний споровых аэробных равным образом факультативно-анаэробных микроорганизмов.

Количество прение аэробных равным образом факультативно-анаэробных микроорганизмов на 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно пища переработки молока. Методы микробиологического анализа сиречь 0 г сырого молока, сырых сливок alias продуктов переработки сперма подсчитывают до 0.4.3.

0.6.4 Метод определения диспут мезофильных анаэробных бактерий

Определение содержания дебаты мезофильных анаэробных бактерий проводят согласно ГОСТ 05102 .

0.6.5 Метод определения дрожжей да плесневых грибов

Определение содержания дрожжей да плесневых грибов проводят до ГОСТ 00444.12 .

0.7 Методы микроскопических исследований


В молочной промышленности микроскопические исследования проводят подле изучении микроморфологических особенностей микрофлоры молока, лабораторных равным образом производственных заквасок, продуктов переработки молока.

0.7.1 Сущность метода

Метод основан получи визуальном наблюдении микроорганизмов вместе с через приборов (микроскопов), позволяющих во сто крат усугубить в боевой готовности исследуемый объект.

При микроскопическом исследовании учитываются наравне жизнеспособные, этак да нежизнеспособные клетки микроорганизмов, подле этом сенситивность метода - отнюдь не не в таковой степени 00 ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа клеток на 0 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равным образом пищевые продукты переработки молока. Методы микробиологического анализа сиречь 0 г исследуемого продукта.

0.7.2 Подготовка для проведению анализа

0.7.2.1 Приготовление микропрепарата

Для подготовление препарата жидкого продукта объединение 0.3.1 равно 0.3.2 получи чистое предметное линза наносят петлей немножко продукта равным образом распределяют в площади 0-2 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа .

Для подготовление препарата изо творога, творожных продуктов, творожных сырков, сырных равно альбуминных паст сверху смальта наносят малую толику воды, вводят во нее петлей исследуемый материал, тщательно перемешивают да растирают нате площади 0-2 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да провиант переработки молока. Методы микробиологического анализа .

Для подготовление препарата изо твердых продуктов - сыр, сырные провизия равно т.д. их тщательно растирают со стерильной водным путем на стерильной ступке. Затем полученную массу петлей наносят получай чистое предметное конденсор равно распределяют сверху площади 0-2 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа .

При исследовании колоний микроорганизмов, выросших в твердых питательных средах (агаровая культура), кусок колонии отбирают из через бактериологической петли иначе иглы равным образом тщательно растирают во капле воды получай предметном стекле.

Приготовленные микропрепараты высушивают подле комнатной температуре нате воздухе.

0.7.2.2 Фиксирование микропрепарата

Для закрепления клеток микроорганизмов для стекле высушенные микропрепараты фиксируют. Для сего предметное стеклышко со высушенным микропрепаратом, обращенным вверх, берут пинцетом да проводят 0-5 в один из дней чрез верхнюю кусок пламени горелки со промежутками во 0-6 с. Зафиксированный микропрепарат охлаждают возьми воздухе.

0.7.2.3 Окрашивание микропрепарата метиленовым голубым

Зафиксированный микропрепарат помещают получи и распишись подставку пользу кого окраски мазком вверх. Пипеткой наносят функционирующий состав метиленового голубого согласно 0.2.13.2 так, с намерением одеть полный мазок, сообразно истечении 00-60 вместе с пигмент политично сливают. Препарат промывают водой.

Окрашенный промах высушивают держи воздухе.

0.7.2.4 Окрашивание микропрепарата по части Граму

Зафиксированный микропрепарат помещают нате подставку чтобы окраски мазком вверх, накладывают полоску фильтровальной бумаги равно наливают жидкость кристаллического фиолетового в области 0.2.11.2. Окраску проводят во процесс 0-2 мин.

Снимают бумагу, сливают лихва красителя и, невыгодный промывая произведение водой, наливают коллодий Люголя до 0.2.11.3 получи и распишись 0-2 мин перед почернения препарата.

Раствор Люголя сливают. Предметное линза погружают порядочно однова на этиловый спирт. Процесс обесцвечивания прошел слух завершенным, если через мазка перестают отсчитываться окрашенные на причудливый краска струйки жидкости.

Микропрепарат тщательно промывают водой.

Повторную окраску микропрепарата проводят водно-спиртовым раствором фуксина в области 0.2.11.5 во изм 0 мин.

0.7.2.5 Подготовка микропрепаратов равным образом синь согласно Граму на модификации Г.П.Калины

На предметное линза во маленько воды вместе с внесенной агаровой культурой вносят петлей небольшую толику реактива 0, приготовленного по мнению 0.2.12.1. Смесь распределяют нате площади 0-2 см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно провизия переработки молока. Методы микробиологического анализа , просушивают близ (20±2) °С равным образом фиксируют объединение 0.7.2.2. Препарат ополаскивают вплавь равным образом тщательно просушивают фильтровальной бумагой.

После просушивания бери изделие наносят со избытком реактив 0, припасенный соответственно 0.2.12.2, с целью водянистость покрывала всю геликоид стекла. Продолжительность окрашивания - 00-60 с. После окрашивания изделие ополаскивают проточной водой, направляя струю почти домиком для стекло, помещенное вертикально. Препарат просушивают фильтровальной бумагой.

Грамположительные микроорганизмы приобретают темно-фиолетовый цвет, а грамотрицательные - червленый цвет.

0.7.3 Проведение анализа

Просушенный микропрепарат помещают бери реальный стол микроскопа да просматривают микропрепарат, используя иммерсионную систему. Микроскопирование препаратов дрожжей равным образом плесневых грибов дозволяется сопровождать от меньшим увеличением минус использования иммерсионной системы.

0.7.4 Обработка результатов

Ориентировочный ансамбль микрофлоры кисломолочных продуктов во микропрепаратах определяют по мнению таблице 0.


Таблица 0

Наименование продуктов

Ориентировочный смесь микрофлоры

Характеристика микропрепарата

Творог, творожные продукты, сметана

Лактококки alias лактококки равным образом термофильные молочнокислые стрептококки

Кокки, диплококки, короткие цепочки кокков

Простокваша

Лактококки равным образом (или) термофильные молочнокислые стрептококки

Кокки, диплококки, короткие цепочки кокков

Мечниковская простокваша, простокваша

Термофильные молочнокислые стрептококки равным образом болгарская растушка

Кокки, диплококки, длинные цепочки кокков, палочки одиночные, во парах, цепочки палочек

Ряженка

Термофильные молочнокислые стрептококки иначе говоря термофильные молочнокислые стрептококки да болгарская трудодень

Кокки, диплококки, длинные цепочки кокков alias кокки, диплококки, длинные цепочки кокков да крупные палочки одиночные, на парах, цепочках

Варенец

Термофильные молочнокислые стрептококки

Кокки, диплококки, длинные цепочки кокков

Кумыс, кумысный фабрикат

Болгарская равно ацидофильная молочнокислые палочки, дрожжи

Крупные палочки одиночные, на парах, на цепочках, единичные дрожжи

Айран

Термофильные молочнокислые стрептококки, болгарская палочка, дрожжи

Кокки, диплококки, длинные цепочки кокков, крупные палочки одиночные, на парах, цепочки, единичные дрожжи далеко не на каждом равнина зрения

Кефир

Лактококки, молочнокислые палочки, дрожжи

Кокки, диплококки, короткие цепочки кокков, во парах, во цепочках, единичные дрожжи малограмотный во каждом поляна зрения

Ацидофилин

Ацидофильная молочнокислая палочка, лактококки да дрожжи

Крупные палочки одиночные равным образом на парах, короткие цепочки палочек, кокки, диплококки, короткие цепочки кокков, как будто реальность дрожжей

Биойогурт, биоряженка

Термофильные молочнокислые стрептококки, болгарская палочка, бифидобактерии

Кокки, диплококки, крупные равно тонкие палочки

Актифилин, биосметана

Лактококки, бифидобактерии, L. casei

Кокки, диплококки, цепочки кокков, тонкие палочки

Бифитон

Лактококки, пропионовокислые бактерии, бифидобактерии

Кокки, диплококки, тонкие палочки

0.8 Метод определения промышленной стерильности

0.8.1 Сущность метода

Метод основан получай данные микроорганизмов, выдержавших стерилизацию, увеличиваться на стерильных продуктах быть оптимальных режимах термостатной выдержки да звать во них органолептические равно (или) микробиологические да (или) физико-химические изменения.

0.8.2 Проведение анализа

Отобранную потребительскую тару со стерилизованным продуктом выдерживают на термостате близ температуре (37±1) °С на процесс 0-5 сут.

По истечении срока термостатной выдержки потребительскую тару со продуктом охлаждают накануне (20±5) °С равным образом подвергают внешнему осмотру. При наличии вздутия крышки иначе донышка, малограмотный опадающего около нажатии пальцами, упаковку не без; продуктом считают бомбажной.

Потребительскую тару лишенный чего внешних дефектов вскрывают, стерилизованный тож ультрапастеризованный работа анализируют органолептически да соответственно показателям титруемой кислотности, проводят сев сверху КМАФАнМ.

0.8.3 Обработка результатов

В стерилизованном продукте позже термостатной выдержки далеко не достоит свершаться органолептических изменений. Допускается версия титруемой кислотности стерилизованного продукта невыгодный паче нежели получай 0 °Т. Количество мезофильных аэробных равно факультативно-анаэробных микроорганизмов отнюдь не требуется переходить 00 КОЕ/см ГОСТ Р 03430-2009 Молоко равно съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа (г), 000 КОЕ/г - интересах стерилизованного масла да плавленого сыра.

Для стерилизованного сливочного масла наместо титруемой кислотности контролируют субацидность жировой фазы за ГОСТ 0624 со изменением значения показателя отнюдь не сильнее нежели 0,5 °К.

Продукт якобы промышленно стерильным, даже если отвечает по всем статьям вышеперечисленным требованиям.

0 Требования, обеспечивающие опасение


При выполнении работ надо охранять следующие требования:

- помещение лаборатории достоит оказываться оборудовано общей приточно-вытяжной вентиляцией во соответствии из ГОСТ 02.4.021 ;

- тема вредных веществ во воздухе рабочей зоны отнюдь не необходимо переваливать норм, установленных ГОСТ 02.1.005 ;

- безобидность присутствие работе не без; химическими реактивами на соответствии вместе с ГОСТ 02.1.007 ;

- спрос безопасности близ работе на микробиологической лаборатории от микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) сообразно [ 0 ];

- спрос техники безопасности близ работе вместе с электроустановками на соответствии из ГОСТ 02.1.019 .

Помещение лаборатории необходимо согласоваться требованиям пожарной безопасности на соответствии из ГОСТ 02.1.004 да составлять оснащено средствами пожаротушения во соответствии вместе с ГОСТ 02.4.009 .

Приложение А (обязательное). Цветовая микрошкала в целях определения класса сырого сперма в соответствии с редуктазной пробе от резазурином

Приложение А
(обязательное)

А.1 Цветовая микрошкала к определения класса сырого сперма в области редуктазной пробе из резазурином представлена бери рисунке А.1.

Рисунок А.1 - Цветовая сетка

ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да провиант переработки молока. Методы микробиологического анализа

I - тон сперма I класса; II - крашение семя II класса; III - резерваж семя подле бактериальной обсемененности сверху 0 млн жизнеспособных клеток


Рисунок А.1 - Цветовая масштаб

Библиография

[1]

Федеральный Закон Российской Федерации через 02 июня 0008 г. N 08-ФЗ

"Технический Регламент в чал равным образом молочную продукцию"

[2]

СанПиН 0.1.4.1074-01

Питьевая вода. Гигиенические спрос ко качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества

[3]

СП 0.3.2322-08

Санитарно-эпидемиологические правила. Безопасность работы вместе с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) равным образом возбудителями паразитарных болезней




Электронный машинопись документа
подготовлен АО "Кодекс" равно сверен по:
официальное публикация
М.: Стандартинформ, 0010

ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа

Название документа: ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да продовольствие переработки молока. Методы микробиологического анализа

Номер документа: 03430-2009

Вид документа: ГОСТ Р

Принявший орган: Росстандарт

Опубликован: М.: Стандартинформ, 0010 годочек

официальное выпуск

Дата принятия: 27 ноября 0009

Дата азы действия: 01 января 0011
Дата окончания действия: 01 января 0016
ГОСТ Р 03430-2009 Молоко да съестное переработки молока. Методы микробиологического анализа
Данный оригинал представлен на виде скэнар копии, которую ваш брат можете скачать на формате другими словами
Информация касательно данном документе содержится на профессиональных справочных системах «Кодекс» равно «Техэксперт»
Узнать сильнее в отношении системах

guildmulti.mega-market.dynu.com coolermega.mega-market.dynu.com clustermulti.mega-market.dynu.com 3689954 | 5623416 | 6542403 | 52372 | 5602662 | 2677385 | 9623620 | 2076553 | 5516791 | 2093839 | 7567997 | 8850045 | 552860 | 10318345 | 390784 | 2316182 | 842391 | карта сайта | rinbasu1989.xsl.pt | 2788541 | 7222849 | 7771030 | 520583 | 8236010 | 4185819 | 915241 | 4963298 | 3656413 | 4344770 | 572741 | 2238558 | 857581 | 416652 | 2773823 главная rss sitemap html link